如何用濾膜法測(cè)細(xì)菌總數(shù)-集菌儀

基于濾膜上細(xì)菌直接計(jì)數(shù)法的細(xì)菌總數(shù)快速檢測(cè)
【摘要】 細(xì)菌總數(shù)快速檢測(cè)在質(zhì)量監(jiān)測(cè)中具有重要的意義，目前除了經(jīng)典的平板培養(yǎng)法以外，還有微菌落法、阻抗法等快速檢測(cè)方法，這些方法或者需要較長(zhǎng)的檢測(cè)時(shí)間，或者需要較高的檢測(cè)成本。本研究提出一種不需要培養(yǎng)而在濾膜上直接計(jì)數(shù)的細(xì)菌總數(shù)的快速檢測(cè)方法，它主要分為過濾、染色、顯微鏡計(jì)數(shù)和計(jì)算四個(gè)步驟。計(jì)算細(xì)菌總數(shù)時(shí)，根據(jù)細(xì)菌在濾膜上的分布特點(diǎn)，對(duì)傳統(tǒng)公式進(jìn)行改進(jìn)，提出按區(qū)域計(jì)算細(xì)菌總數(shù)的計(jì)算方法，提高了檢測(cè)精度。研究結(jié)果表明，該方法與傳統(tǒng)的平板培養(yǎng)法無(wú)顯著性差異（t=0.847，P=0.436＞0.05），是一種低成本、快速的細(xì)菌總數(shù)檢測(cè)方法。
1 引 言
細(xì)菌總數(shù)計(jì)數(shù)的研究已有很多，目前國(guó)標(biāo)規(guī)定的方法為平板計(jì)數(shù)法，該方法是將樣品加入瓊脂營(yíng)養(yǎng)基，在37 ℃下培養(yǎng)24～48 h后計(jì)數(shù)。這種方法精度高，但耗時(shí)長(zhǎng)，難以滿足實(shí)際工作需要。為了簡(jiǎn)化檢測(cè)程序、縮短檢測(cè)時(shí)間，國(guó)內(nèi)外學(xué)者進(jìn)行了大量的快速檢測(cè)方法的研究，提出了阻抗檢測(cè)法〔1〕、Simplate TM全平器計(jì)數(shù)法〔2〕、微菌落技術(shù)〔3-5〕、紙片法〔6-7〕等檢測(cè)方法，取得了的成果，但檢測(cè)時(shí)間仍在4 h以上。
本研究在分析了已有研究成果的基礎(chǔ)上，提出了在濾膜上染色后，直接計(jì)數(shù)的細(xì)菌總數(shù)檢測(cè)方法，具體步驟為：用集菌儀進(jìn)行細(xì)菌收集→在膜上進(jìn)行染色→在油鏡下計(jì)數(shù)→按公式計(jì)算出菌液濃度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，該方法與傳統(tǒng)的平板培養(yǎng)法無(wú)顯著性差異，檢測(cè)時(shí)間約1 h，是一種快速的細(xì)菌總數(shù)檢測(cè)方法。